Agar jest polimerem stosowanym do hodowli bakterii. Agar jest najpierw dostarczany w postaci proszku, a po rozpuszczeniu we wrzącej wodzie i schłodzeniu, zestala się na twardej powierzchni w celu rozwoju bakterii. Istnieje wiele różnych rodzajów agaru, które można wykorzystać do wzrostu bakterii będących przedmiotem zainteresowania, w zależności od gatunku i potrzeb badawczych. Odżywczy agar jest popularny, ponieważ może rosnąć wiele rodzajów bakterii i grzybów i zawiera wiele składników odżywczych potrzebnych do silnego wzrostu bakterii.
Wideo dnia
Składniki agaru odżywczego
Agar odżywczy zawiera 0,5% peptonu, który jest enzymatycznym trawieniem białka zwierzęcego. Pepton jest głównym źródłem azotu organicznego dla rosnących bakterii. Odżywczy agar zawiera również 0,3% ekstraktu wołowego, który zawiera substancje rozpuszczalne w wodzie, które wspomagają wzrost bakterii, takie jak witaminy, węglowodany, organiczne związki azotu i sole. Ostatnim składnikiem agaru odżywczego jest 1,5-procentowy agar, który jest czynnikiem krzepiącym.
Jak zrobić agar odżywczy
Rozpuścić wcześniej wymienione składniki w pożądanej objętości wody. Aby uzyskać 1 litr agaru odżywczego, dodaj 5 gramów peptonu, 3 gramy ekstraktu z wołowiny i 15 gramów agaru i upewnij się, że końcowa objętość tej mieszaniny wynosi 1 litr, dodając wodę destylowaną. Podgrzać tę mieszaninę, mieszając, aby w pełni rozpuścić wszystkie składniki. Autoklawić rozpuszczoną mieszaninę w temperaturze 121 stopni Celsjusza przez 15 minut w obiegu cieczy.
Jak wlać płytki pożywki agarowej
Gdy agar odżywczy zostanie sterylizowany w autoklawie, pozwolić mu ostygnąć, ale nie zestalić. W razie potrzeby dodaj antybiotyki. Zdejmij pokrywy i rozprowadź odpowiednią liczbę płytek Petriego na sterylnej powierzchni. Ogólnie rzecz biorąc, 1 litr agaru wyleje około 50 dużych płytek Petriego o średnicy 100 milimetrów lub 100 małych szalek Petriego o średnicy 60 milimetrów. Podpal płomień w pobliżu, aby zachować również sterylność obszaru wokół płytek. Podczas otwierania butelki agaru przepuść otwór przez płomień, aby go wysterylizować. Wlać pożywkę agarową do każdej płytki i pozostawić płytki na sterylnej powierzchni, aż agar się zestali. Wymień pokrywkę każdej szalki Petriego i przechowuj płytki w lodówce.
Zalecenia dotyczące nalewania i przechowywania talerzy
Napełnij każdą płytkę od połowy do dwóch trzecich. Postaraj się wyeliminować wszystkie pęcherzyki powietrza, ponieważ utrudnią one rozprzestrzenianie się bakterii po płycie po jej zestaleniu. Bąbelki mogą zostać zerwane za pomocą płomienia. Przechowuj płytki agarowe do góry nogami w lodówce. Zapobiegnie to kapaniu kondensatu na pokrywie szalki Petriego na zestalony agar. Jeśli przechowujesz płytki przez dłuższy czas, sprawdź rozwój bakterii lub suszenie przed ich użyciem.Płytki zawierające antybiotyki należy zużyć w ciągu 2 tygodni od przygotowania.
